家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导人家蚕细-名校题库网

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家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导人家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

问题：

（1）进行转基因操作前，需用_______酶处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。（3分）

（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间；若要检测干扰素基因在家蚕中是否表达，可分别采用_________、_________的方法逐步鉴定。（6分）

（3）通过PCR技术可大量获取目的基因，该PCR反应体系的主要成分包含扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_________和_________。（6分）

正确答案及解析

正确答案

解析

（1）胰蛋白

（2）分子杂交；抗原-抗体结合

（3）耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）；DNA引物

解析：（1）动物细胞培养时，因动物组织细胞聚合在一起，需要用胰蛋白酶进行处理，水解组织中的蛋白质，以便获得单个细胞。

（2）基因表达包括转录和翻译两个步骤，要检测目的基因是否转录，可采用分子杂交技术，要检测目的基因是否翻译．可采用抗原一抗体杂交法。

（3）聚合酶链式反应（PCR）是一种用于扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。采用PCR扩增目的基因时，其体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）和DNA引物。